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基因過表達:慢病毒/腺病毒包裝

技術簡介


病毒感染法是目前最常用的基因導入方式之一。通過對病毒基因組的遺傳改造,使之攜帶外源目的基因,并被包裝成病毒顆粒。病毒進而侵染宿主,使攜帶的外源基因在宿主體內表達。


常見的病毒表達系統有慢病毒、腺病毒等。

慢病毒感染宿主細胞時,可將攜帶的外源基因隨機、穩定地整合入宿主細胞基因組中,實現目的基因穩定、長期的表達,非常適合于構建基因過表達或干擾穩定細胞株。

腺病毒感染宿主細胞時,其基因組及其攜帶的外源基因游離于宿主基因組外獨立表達,因此可實現目的基因瞬時、高豐度的表達,同時還避免了因整合而引發的潛在基因突變和隨機效應,安全性和可控性高。



應用領域


基因功能研究、細胞模型建立等。



技術流程



     構建病毒表達載體 → 包裝慢病毒/腺病毒 → 病毒濃縮純化 → 病毒滴度檢測
輝駿生物基因過表達技術流程



技術優點


病毒的轉導效率比常規真核表達載體高很多,因此特別適合于介導外源基因在難轉染甚至無法轉染的哺乳動物細胞中表達。



參考文獻(客戶發表)


1.The FEN1 L209P mutation interferes with long-patch base excision repair and induces cellular transformation. Oncogene (2016).

2.FEN1 promotes tumor progression and confers cisplatin resistance in non-small-cell lung cancer. MolOncol. 11(6):640-654 (2017).

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