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載體構建與改造實驗技術服務
載體構建與改造的基本實驗步驟包括目的DNA片段制備和載體的制備或改造,載體與克隆片段連接和轉化,陽性克隆篩選,根據載體和克隆片段的不同要求,可實現基因突變,病毒載體的構建等技術服務。
基因調取、合成(cDNA克。
一、服務簡介 (1)基因調取和基因合成 A. 基因調。簭募毎蚪M織中提取總DNA或總RNA后擴增出目的基因; B. 全基因合成:通過化學合成的方法獲得目的DNA序列。 基因調取價格較低,但容易出現SNP,基因合成準確性很高,但價格稍高。 (2)定點突變 定點突變是指通過 聚
熒光定量PCR(qPCR)實驗技術服務
熒光定量PCR(實時定量PCR,qPCR)實驗步驟主要包括熒光定量PCR引物設計,熒光定量PCR,實驗結果分析。目前,根據檢測原理不同可分SYBR Green,TaqMan探針法等方法。通過對DNA或RNA的熒光定量PCR監測, 實現基因的相對定量、絕對定量和定性分析。
定點突變
一、服務簡介 定點突變 定點突變是指通過 聚合酶鏈式反應 (PCR)等方法向目的DNA片段(可以是基因組,也可以是質粒)中引入所需變化,包括堿基的添加、刪除、突變等。 定點突變常用于探索調控區(如啟動子等)的關鍵位點,以及研究蛋白質結構與功能之間的關系。 二、
microRNA表達載體構建實驗技術服務
microRNA(miRNA)表達載體構建實驗技術服務主要將pre-miRNA序列插入到表達載體的啟動子后面,在細胞中轉錄出pre-miRNA后進一步被加工成microRNA,microRNA與其靶基因的mRNA相互作用從而抑制其靶基因表達。
RT-PCR實驗技術服務
反轉錄RCR(RT-PCR)實驗技術服務主要包括引物設計,RNA提取,反轉錄和PCR。提取RNA后,以隨機引物、oligo(dT)或基因特異性的引物進行反轉錄。然后以基因特異性的引物進行PCR,電泳分析目的條帶的灰度值,進而判斷目的基因mRNA轉錄水平的相對變化量。
siRNA載體構建實驗服務
siRNA表達載體構建實驗技術服務主要包括引物設計與外源基因克隆,將表達siRNA的雙鏈DNA插入到啟動子下面,導入細胞后表達siRNA,依據表達載體的不同,可分為siRNA質粒表達載體和siRNA病毒表達載體,siRNA病毒表達載體可以感染常規轉染效率比較低的細胞。
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