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TMT標記定量蛋白質組學

技術概述

TMT™(Tandem Mass Tag™)技術是由美國Thermo Scientific公司研發的一種多肽體外標記技術。該技術采用10種同位素的標簽,標記多肽的氨基基團,經過LC-MS/MS分析,可同時比較10組不同樣品中蛋白質的相對含量。
       
TMT技術是常用的差異蛋白質組學技術,在疾病標記物篩選、藥物作用靶點、動植物抗病/抗脅迫機制、動植物發育分化機理等領域都有廣泛應用。


技術原理


TMT試劑由三部分組成:質量報告基團、質量標準化基團和氨基反應基團。

       
質量報告基團有10種不同的分子量,質量標準化基團也10有種不同的分子量,與不同的報告基團搭配,能保證被標記的不同來源的同一肽段在一級質譜中具有相同的質荷比;氨基反應基團能與肽段N端及賴氨酸側鏈氨基發生共價連接使肽段連上標記。

TMT技術 TMT服務 TMT實驗 TMT標記定量
 一級質譜中,任何一種TMT試劑標記的不同樣品中的同一肽段表現出相同的質荷比;二級質譜中,可切割鍵(箭頭所指)斷裂釋放出TMT報告離子,在質譜低質量區產生了10個TMT報告離子峰,其強度反應了該肽段在不同樣品中的相對表達量信息,另外二級質譜中的肽段碎片離子峰質荷比反應了該肽段的序列信息;這些質譜原始數據經過數據庫檢索,可得到蛋白質的定性和相對定量信息。
 


技術優勢

1. 靈敏度高:低豐度蛋白也能檢測出;

2. 適用范圍廣:幾乎可對任何物種的各類蛋白質進行分離鑒定;

3. 高通量:能同時對10組樣本中包含的蛋白進行鑒定及表達差異分析;

4. 高效:液相色譜與串聯質譜連用,自動化操作,分析速度快,分離效果好。
 


技術流程

蛋白樣本制備——胰酶酶解——TMT標記——肽段混合——LC-MS/MS檢測——數據庫檢索——數據分析

服務信息

各類型樣本的具體送樣要求請咨詢在線客服,或撥打客服熱線:400-699-1663。

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