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DIGE(2D-DIGE)實驗技術服務

DIGE概述


DIGE(雙向熒光差異凝膠電泳,Two-dimensional fluorescence difference in gel electrophoresis,2D-DIGE),是由傳統雙向電泳發展而來的新型蛋白質組定量技術,其分離蛋白的基本過程與傳統雙向電泳相同,主要利用蛋白質的等電點和分子量差異來分離蛋白質混合物。DIGE用三種熒光染料(Cy2, Cy3和Cy5)分別標記不同組別的蛋白,通常情況下,Cy3和Cy5分別標記對照組和實驗組的蛋白,而Cy2標記對照組和實驗組蛋白的混合物,作為內參使用。之后將三種標記的蛋白樣品等量混合,在一張凝膠上進行雙向電泳,電泳完凝膠用不同波長的激光掃描,即可得到三組標記蛋白蛋在同一張凝膠中的掃描圖。膠圖經專業軟件分析對比,便可得到準確的定量信息。



與傳統雙向電泳(銀染或考染膠)相比,DIGE有以下優勢 


1、靈敏度高,可檢測低至125 pg的蛋白質;

2、高效,同一塊凝膠上可以檢測兩個混合樣品的蛋白表達情況,簡化了實驗流程,減少了操作誤差;

3、線性范圍更廣,動態范圍高達10-5;

4、定量更精確,內標消除了凝膠與凝膠之間的實驗誤差,顯著提高了結果的精確度和可重復性。

5、統計學分析,ImageMaster7.0(DIGE)軟件自動分析,得到統計結果,降低了人為分析偏差。



DIGE技術服務流程


DIGE(2D-DIGE),熒光定量蛋白質組學,技術服務
圖1:DIGE技術服務流程
 

對照組和實驗組蛋白樣品分別用Cy3和Cy5標記,同時將實驗組與對照組的樣品等量混合用Cy2標記,作為內標。之后等量混合三種熒光標記的蛋白樣品,用2D-PAGE電泳分離,凝膠經熒光掃描后,用ImageMaster 7.0(DIGE)軟件分析同一蛋白質在不同樣品中的表達差異。
 


DIGE技術服務內容


輝駿生物:DIGE技術服務內容


送樣須知


樣本應避免各類污染和反復凍融,妥善保存,用液氮或干冰保存寄送;廣州本地客戶可上門收樣。

注:DIGE熒光染料可標記多種類型的蛋白樣本,如組織、細胞、細菌等材料,但不同類型的樣本其蛋白需求量有所不同,具體請咨詢我司。

 


實驗服務報告內容


DIGE實驗服務報告內容

 


DIGE實驗服務案例


輝駿生物DIGE實驗服務案例
 

 圖2:DIGE定量分析結果


蛋白質樣品經過熒光染料標記后雙向電泳,ImageMaster7.0 (DIGE)分析差異點結果。

 


實驗服務周期及收費標準


咨詢本公司:400 699 1663
 


質量承諾


1、Cy2作為內標,確保定量的準確;

2、提供客觀的DIGE實驗分析結果。
 

歡迎索取顧客在輝駿生物做的DIGE技術服務所發表的樣板文章。
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