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親和純化(AP-MS)

實驗目的


尋找靶蛋白的互作蛋白
 


AP/MS服務簡介


與常規Co-IP實驗類似,只是親和純化法可不用引入抗體。將標簽(如SBP)與特定基因融合表達,融合蛋白用鏈霉親和素(strep)磁珠親和純化,經生物素洗脫,即可得到蛋白復合物。將實驗組和對照組的洗脫蛋白分別做質譜,在實驗組結果中扣除對照組中的蛋白,即可鑒定出與靶蛋白互作的蛋白。



AP/MS技術優勢


AP/MS技術優勢



服務內容


1、構建含SBP標簽的靶基因表達載體質粒;
 
2、目的細胞中過表達帶標簽的誘餌蛋白,細胞裂解液做WB檢測表達效果;
 
3、用strep微珠進行蛋白復合物的純化和洗脫;
 
4、實驗組和對照組的洗脫液分別用胰酶酶解;
 
5、LC-MS/MS,獲得蛋白質的定性信息;
 
6、結果分析與報告整理。




技術流程圖


輝駿生物:親和純化(AP-MS)

輝駿生物:親和純化(AP-MS)服務內容
 
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